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蛋白转导结构域修饰小鼠干扰素-γ的研制
Preparation of Protein Transduction Domain Modified Mice IFN-γ
| 论文名称： |
蛋白转导结构域修饰小鼠干扰素-γ的研制 |
| 期刊： |
2010年1月第21卷第1期 |
| 作者： |
胡大强 （第三军医大学第三附属医院药剂科，重庆市 400042） |
| Author： |
HU Da-qiang （Dept. of Pharmacy ，The Third Affiliated Hospital of The Third Military Medical University ，Chongqing 400042，China） |
| 中图分类号： |
R965；R979.5 |
| 文献标示码： |
A |
| 文章编号： |
1001-0408（2010）01-0047-03 |
| 关键字： |
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| 论文摘要： |
摘 要 目的：制备蛋白转导结构域修饰小鼠干扰素-γ（PTD-mIFN-γ），为研究PTD-mIFN-γ功能作准备。方法：以质粒pUC19/mIFN-γ为模板，经3轮聚合酶链反应（PCR）扩增编码PTD-mIFN-γ片段，克隆于质粒pUC19上，测序鉴定正确后构建到pQE80L 表达质粒载体中，经BamH Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切后1.2% 琼脂糖凝胶电泳鉴定，利用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和Western blot 法检测表达的目的蛋白，镍离子-次氨基三乙酸（Ni2＋-NTA ）凝胶亲和层析纯化重组蛋白，酶联免疫吸附实验（ELISA）检测PTD-mIFN-γ。结果：PCR 扩增得到编码PTD-mIFN-γ的cDNA ，SDS-PAGE 和Western blot 法分析显示重组蛋白获得了高效表达，ELISA 法检测出目的蛋白。结论：成功制备了PTD-mIFN-γ。 |
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